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你知道淋巴細(xì)胞分離液的操作步驟嗎?不懂的進(jìn)來(lái)看看吧!

更新時(shí)間:2021-04-23 點(diǎn)擊次數(shù):2232
   淋巴細(xì)胞分離液可用于體外分離外周淋巴血細(xì)胞,也可以從其他來(lái)源中分離單核細(xì)胞,包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞,適用于從血液及組織勻漿中分離所需細(xì)胞,在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物中廣泛應(yīng)用。其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液。
  淋巴細(xì)胞分離液操作步驟是哪些?今天由重慶市華雅的小編給大家介紹下。淋巴細(xì)胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的分離,也適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物單個(gè)核細(xì)胞的分離。具有低毒、高得率、高純度等特點(diǎn)。
  使用操作步驟:
 ?。?)取新鮮抗凝全血或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。
 ?。?)在離心管中加入適量分離液,將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。
  (3)室溫,水平轉(zhuǎn)子500~1000g,離心20~30min。
 ?。?)離心后將出現(xiàn)明顯的分層:最上層是稀釋的血漿層,中間是透明的分離液層,血漿與分離液之間的白膜層即為淋巴細(xì)胞層,離心管底部是紅細(xì)胞與粒細(xì)胞。
 ?。?)小心的吸取白膜層細(xì)胞到15mL潔凈的離心管中, 10mL PBS或細(xì)胞洗滌液洗滌白膜層細(xì)胞。250g,離心10min。
  (6)棄上清,5mL的PBS或細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞,250g,離心10min。
 ?。?)重復(fù)步驟6;
 ?。?)棄上清,細(xì)胞重懸備用。
  淋巴細(xì)胞分離液原理是什么?
  重慶市華雅告訴大家血液中單獨(dú)核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,其容積、形狀和溶解度與別的細(xì)胞不一樣,淋巴細(xì)胞分離液是某種密度接近1.075∽1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相對(duì)密度梯度分布,進(jìn)而將各類血細(xì)胞多方面分離。
  以上僅供參考,希望對(duì)您有所幫助!

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